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培养基的基本配置方法

点击次数:1007   发布时间:2020/1/15 9:27:40

    培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。

    产品名称:培养基

    英文名称:Medium

    产品成分:水、氮源、无机盐、碳源等

    保存方法:防潮、避光、阴凉处保存

    保存温度:2-25℃

    特殊营养物质:维生素、氨基酸、碱基等

    作用:供微生物、植物和动物组织生长

    培养基的配制

    1.配料

    配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。

    2.溶解

    淀粉溶解:少量冷水调成糊状

    加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。

    3.调PH

    用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。

    4.过滤

    滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去)

    5.分装

    一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

    (1)三角瓶

    若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,多不能超过150ml培养基/250ml的

    三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。

    (2)试管分装

    液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;

    固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。

    6.包扎

    分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

    7.灭菌

    按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养

    基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

    8.摆斜面

    灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。

    9.贮存

    培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用
 

原创作者:上海恒远生物技术发展有限公司

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