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技术文章

血浆游离血红蛋白测定方法

点击次数:1424   发布时间:2012/8/3 11:05:43

ELISA试剂盒分析:血浆游离血红蛋白测定方法

实验原理

  血红蛋白具有类过氧化物酶活性,可催化H2O2释放新生态氧,使邻甲联苯胺氧化发生颜色变化,由无色*终变为蓝紫色。根据显色深浅与标准进行比较,可测出其含量。
实验方法
  材料:
  1.2g/L邻甲联苯胺溶液
  2.1%H2O2
  3.10%醋酸溶液
  4.分光光度计
  方法:
  1.抽取静脉血2-3ml,枸橼酸钠抗凝,离心分离血浆。
  2.按下表进行操作,用分光光度计,波长为530nm,以空白管调零,测定测定管的吸光度。

试剂 (ml)
测定管
空白管
2 g/L邻甲联苯胺溶液
0.5
0.5
患者血浆
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混匀后室温放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0
室温放置10min

  3.计算公式
  血浆游离Hb(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100
实验结果计算
  参考范围:0-40mg/L
注意事项
  1.一切容器避免血红蛋白污染;
  2.采血要顺利,器皿要干燥,检测血浆要新鲜,及时分离,防止人为溶血;
  3.邻联苯胺溶液具致癌性,检测时要小心,废液要妥善处理,以免污染;
  4.双氧水要新鲜配置,浓度要准确

原创作者:上海恒远生物技术发展有限公司

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