联系我们/CONTACT US

联系人：钱经理

电话：13636351217

手机：13636351217，13636351073

地址：上海市松江临港科技城汉桥文化科技园B座

邮编：201615

传真：021-64881400

邮箱：2881726255@qq.com

阿仪网商铺：http://www.app17.com/c60514/

手机网站：m.shhyswkj.com

产品分类/PRODUCT CLASS

技术文章

带你了解原代细胞鉴定技术

点击次数：3403 发布时间：2020/8/19 9:26:44

一、形态学鉴定
在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征
细胞染色检查：
1 将无菌玻片置于细胞培养皿中，加细胞悬液后培养；
2.待细胞长满玻片后取出，用PBS清洗，之后放于载玻片上，待其自然干燥；
3.用PBS/甲醇（1:1）固定15分钟；
4.弃固定液，加合适的染色液染色；
5.染色完毕后用清水洗净，置于空气中干燥，
6.干燥后，用二甲苯透明，光学树脂封片后观察。

二、免疫组织细胞化学鉴定
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片；
2. PBS清洗标本3次，各1 分钟；
3. 4%多聚甲醛固定15分钟；
4. 置于空气中干燥；
5. PBS清洗标本3次，各2 分钟；
6. 0.5%Triton X-100孵育 1次20分钟；
7. PBS清洗标本 3次各2分钟；
8. 3%H2O2孵育 15分钟；
9. DPBS清洗标本 3次各2 分钟；
10. 封闭血清孵育（5%正常二抗血清DPBS液20分钟）
11. 一抗孵育，4℃ 过夜或37℃ 60 分钟；
12. PBS清洗标本3次各5 分钟；
13. 二抗工作液孵育（湿盒）37℃ 30 分钟；
14. PBS清洗标本3次各5 分钟；
15. C液（湿盒） 37℃ 30 分钟；
16. PBS清洗标本3次，各5 分钟；
17. 用显色液进行显色；
18. 蒸馏水洗涤2次1 分钟；
19. 苏木素复染1分钟；
20. 清水洗涤30分钟；
21. 光学树脂封片后观察。

希望以上文章能帮助大家了解目前研究进展及我们的核心技术，欢迎各位老师联系我们咨询、提出意见，愿我们的努力成果与您的科研碰撞出不一样的火花！

上海恒远生物主营胎牛血清、生物试剂、elisa试剂盒、培养基抗体等，高品质为您提供gibco、hyclone、nqbb、sigma等各个品牌的血清，质量保证、价格实惠，欢迎广大客户来电咨询！